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| 赛默飞世尔参与推出禽流感快速高通量检测新技术 2/22/2009 | |
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(点击放大)2009年2月18日,中国上海——赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)旗下产品KingFisher系列自动化磁珠提取纯化仪器,联合Invitrogen公司Ambion病毒RNA提取试剂盒,将传统方法的禽流感检测由21天缩短至4小时左右。此技术经过美国国家兽医服务实验室(NVSL)验证,是美国农业部认可的禽流感检测的分子生物学方法。该技术已由赛默飞世尔公司引进中国,将对促进我国禽产品的出口创汇、降低成本和疫情早期诊断具有重大意义。 禽流感快速高通量检测新技术是基于分子生物学的方法,在病毒感染的初期即可快速确诊病毒的存在。该方法包括两大主要步骤。第一步,联合使用赛默飞世尔公司的KingFisher自动化磁珠提取纯化仪器,及Invitrogen公司的Ambion病毒RNA提取试剂盒,进行自动化的病毒RNA提取。该步骤需要约30分钟。第二步,实时定量RT-PCR检测病毒RNA。该步骤需要约3小时。整体方法经过优化,并经过超过200,000禽类咽喉拭子样品的检测验证。 这项技术可以用于从生物体液和无细胞样品中,如血清、血浆、口腔拭子和细胞培养液中,提取病毒RNA。从无细胞样品中分离纯化RNA比从组织和培养细胞中分离纯化RNA更具挑战性。这是因为低的病毒滴度、大的操作体积和样品的复杂性,且操作步骤必须适合实时定量RT-PCR。使用自动化磁珠提取方法可满足上述各项要求,赛默飞世尔公司的KingFisher专利磁珠提取技术,不需有机溶剂或RNA沉淀步骤,消除了基于滤膜的方法经常碰到的问题,如滤膜堵塞、大的洗脱体积和不稳定的产率。而结合后续的实时定量RT-PCR,可仪检测到低至10拷贝的病毒RNA,极大提高了禽流感病毒检测的灵敏度。 禽流感快速高通量检测新技术比较传统方法的优势 •灵敏度极高,可从100-400ul样品中分离到少至10拷贝的病毒RNA •对于96个样品,整个磁珠提取纯化过程不超过30分钟,整个禽流感检测过程不超过4个小时 •用于低病毒浓度时尤其理想 •线性纯化效率低至50转录子 •经美国国家兽医服务实验室(NVSL)认证可用于AI/ND病毒 线性纯化效率可低至10拷贝的转录子 用MagMAX病毒RNA提取试剂盒,可以从血浆和血清中定量纯化病毒RNA,线性范围大于约5个数量级。这可由血浆、血清和水样品的试验体系中,以系列稀释的RNA作对照。图一的定量RT-PCR结果说明RNA的纯化率在很大的病毒浓度的范围内均为线性,含少至10个拷贝的转录子的样品也可被纯化。 (图片) | |
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赛默飞世尔科技(中国)有限公司(Thermo Fisher Scientific) (点击访问) 电话:86 -21 -68654588 地址:上海浦东新金桥路27号6号楼 | |
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